地中海贫血概述

• 定义：珠蛋白基因变异致珠蛋白肽链合成障碍的遗传性溶血性贫血，常染色体隐性遗传。
• 分类：α - 地贫（HBA2、HBA1 基因缺陷）和β - 地贫（HBB 基因缺陷）。
• 临床表现：α - 地贫分静止型、轻型、HbH 病和 HbBart's 水肿胎综合征；β - 地贫分静止型、轻型、中间型和重型。
• 防控意义：减少重型患儿出生，减轻家庭与社会负担。
• 流行情况：我国南方高发，北方也有病例，北方部分地区孕妇地贫变异携带率高。

当前地贫防控策略及局限性

• 策略：“多层级序贯筛诊”模式，先血液学表型筛查，再用多种方法检测阳性样本基因型。
• 局限性：流程冗繁，成本高，咨询压力大，易漏检部分携带者及罕见结构变异。
• 二代测序局限性：读长较短，对缺失和重复型变异检测准确性有限，可能造成误检和漏检，无法判断变异是否在同一条染色体上。

单分子实时测序技术优势

• 技术特点：长读长，准确识别碱基序列，高准确度模式兼具长读长特点。
• 检测能力：拓宽地贫基因变异检测范围，确定α - 和β - 珠蛋白基因单体型和结构重排，提高检出率，降低误检和漏检率。
• 应用情况：应用广泛，积累超 50 项临床研究和 30 万例临床应用数据。

单分子实时测序技术临床应用

适用范围

• 可用于地贫携带者筛查、产前诊断、新生儿筛查及患者诊断。

适用人群

• 携带者筛查：血液学指标高风险或高发地区的孕前或孕早期夫妇。
• 产前诊断：有重型地贫生育高风险、需介入性产前诊断的家庭。
• 新生儿筛查：高发地区的新生儿。
• 患者诊断：血常规或血红蛋白电泳筛查阳性的新生儿、儿童、成人或家庭成员。

慎用人群

• 近期接受全血、白细胞成分输血或造血干细胞移植的就诊者，输血者 4 - 6 个月后采血或采其他组织细胞检测，移植者采其他组织细胞检测。

检测变异范围

• 明确检测中国人群α - 和β - 地贫热点和常见变异。
• 建议检测中国人群α - 和β珠蛋白基因罕见变异。
• 建议检测δ - 珠蛋白基因 HBD 致血液学表型异常的变异。
• 可拓展检测修饰基因用于疑难地贫病例。

珠蛋白基因的罕见变异

• α-和β-珠蛋白基因罕见变异
  • 中国人群α-和β-珠蛋白基因罕见变异占比
  • 检测罕见变异的价值
  • 临床发现的部分罕见变异
  • 传统β-地贫检测方法覆盖的部分点突变
• δ-珠蛋白基因相关变异
  • 变异影响
  • 中国人群热点变异
  • 常见变异
  • 罕见变异

检测前咨询与知情同意

• 遗传咨询内容
  • 了解家族史、患病史及检测目的
  • 告知检测必要性、流程、可能结果及意义
  • 告知检测后需进一步检查和随访及影响因素
• 咨询要点
  • 了解就诊者信息判断适用人群
  • 说明检测相关信息及后续干预方案
  • 强调可能检出无症状携带者及遗传咨询重要性
  • 说明影响检测结果因素
  • 告知随访妊娠结局
  • 承诺保护隐私避免基因歧视
  • 询问近期输血或造血干细胞移植情况
  • 签署知情同意书等文件

规范化样本检测与报告

• 推荐意见
  • 遵循标准化操作流程和质量控制体系
  • 参考权威数据库和指南解读变异
  • 建立专业小组协同审核确定变异致病性
• 样本采集、运输和存储
  • 不同样本采集要求
  • 运输和保存条件
  • 样本送达后检查处理
  • 合格样本保存要求
• 基因组DNA提取、文库构建、上机测序和数据分析
  • 实验操作规范
  • 实验室管理与环境要求
  • 质量控制体系
• 变异解读
  • 参考权威数据库和指南
  • 定期更新地贫数据库信息
• 报告撰写
  • 报告包含内容
  • 检测发现变异结合临床信息确认
  • 双人核对审核签发报告

检测后的遗传咨询和干预

• 推荐意见
  • 受检者检测后接受遗传咨询
  • 医师结合家系和临床情况分析报告
• 携带者筛查
  • 提供书面报告和遗传咨询
  • 夫妇一方为携带者或患者对配偶检测及咨询
• 产前诊断
  • 高风险夫妇接受产前诊断
  • 重型地贫胎儿处理
  • 中间型地贫纳入高危妊娠管理
• 新生儿筛查
  • 患儿基因检测和分型及管理
  • 高发地区筛查阴性新生儿管理
• 患者诊断
  • 综合诊断和分型
  • 制定个性化治疗方案
  • 随访监测和心理支持

局限性

• 技术局限性
  • 引物覆盖度导致罕见结构变异检测问题
  • 缺失变异检测
  • 重复变异检测
• 样本要求的局限性
  • 控制样本交叉污染
  • 产前诊断排除母源污染
  • 考虑样本嵌合可能性
• 变异解读的局限性
  • 部分变异缺乏致病性评估信息
  • 基因检测进展影响致病性判定
  • 基因型和表型对应关系不确定

在线资源

• 相关网址罗列